Die Rolle eines NE-proteins in der Adipogenese

Fettzellen spielen eine wichtige Rolle im Energiehaushalt und Stoffwechsel von tierischen Organismen. Durch die Analyse von genetisch veränderten Mäusen und Zellenlinien konnten wichtige Fettzell-Transkriptionsfaktoren und Signalwege entdeckt werden. An detailliertem Einblick in adipogene Mechanismen mangelt es jedoch noch. Ein kürzlich entdecktes NE-protein interagiert mit wichtigen lipogenen Regulatoren. Möglicherweise spielt es daher auch selbst eine wichtige Rolle in der Adipogenese. NE-proteine sind an der Entstehung von vielen genetischen Krankheiten beteiligt. Daher formuliere ich eine Kern-Hypothese für diesen Projektantrag: "Ein bestimmtes NE-protein ist für die Fettzellentstehung essentiell da es die Funktion wichtiger Faktoren in der Adipogenese reguliert." Um diese Hypothese zu überprüfen werde ich folgende Ziele verfolgen: Ziel 1) Analyse der Rolle des NE-proteins während der adipogenen Differenzierung Um meine Kern-Hypothese zu prüfen welche besagt dass das NE-protein für die Fettzelldifferenzierung essentiell ist werde ich es in 3T3L1 und OP9 Zellen durch RNAi down knocken. Anschließend wird es möglich sein dessen Wirkungen auf die Adipogenese zu bestimmen. Ziel 2) Aufklärung der intrazellulären Lokalisierungsdeterminanten des NE-proteins und seiner Interaktion mit anderen lipogenen Faktoren. Wenn wir herausfinden dass das NE-protein essentiell für Fettzellentwicklung ist werde ich seine subzelluläre Lokalisierung und seine intrinsischen Lokalisationsdeterminanten mittels Mutationsanalyse untersuchen. Außerdem wird die Frage ob es physisch mit anderen essentiellen Faktoren in der Fettzelldifferenzierung interagiert durch Co- Immunoprezipitation geklärt werden. Ziel 3) Zu klären in wieweit das NE-protein durch seine spezifische Aktivität andere adipogene Faktoren beeinflusst Wenn das NE-protein für die Adipogenese und die Lokalisierung/Aktivierung von adipogenen Faktoren entscheidend ist dann werden wir zu klären versuchen ob seine spezifische Aktivität für die Fettzellentstehung essentiell ist.