Translation von "leaderless mRNAs" in S. solfataricus

Der Mechanismus der Translation in Archaea (vormals Archaebakterien) ist weitgehend unverstanden. Der translationale Apparat von Archaea weist Komponenten auf, die Ähnlichkeit mit dem von Eubakterien, als auch dem von Eukaryonten besitzen. Archaea besitzen translationale Initiationsfaktoren, die Homologie zu den in Eubakterien und Eukaryonten vorkommenden aufweisen. In dieser Studie sollen die Funktion der translationalen Initiationsfaktoren aIF1, IF2 und aIF2 des Archaeons Sulfolobus solfataricus untersucht werden. Ein Hauptaugenmerk soll auf die Funktion der betreffenden Initiationsfaktoren in der translationalen Initiation von mRNAs gelegt werden, die direkt mit dem AUG Startkodon beginnen. Solche mRNAs treten in S. solfataricus gehäuft auf. S. solfataricus wurde als "Modellarchaeon" ausgewählt, da dessen DNA fast vollständig durchsequenziert und frei zugänglich ist. Dies sollte ermöglichen die betreffenden Gene für Initiationsfaktoren zu klonieren und die entsprechenden Proteine zu reinigen. Darüberhinaus stehen für S. solfataricus PLasmide zur Verfügung. Damit sollte es wiederum möglich sein die Funktion dieser Faktoren in S. solfataricus zu untersuchen. Dieses Forschungsvorhaben beinhaltet 2 Ziele: Erstens soll ein in vitro System aufgebaut werden, daß es ermöglichen soll die Funktion der Initiationsfaktoren biochemisch zu untersuchen. Zweitens sollen diese Faktoren in S. solfataricus überexprimiert werden. Damit soll untersucht werden, ob IF2 und aIF2 die Genexpression in S. solfataricus differentiell beeinflussen. Falls dies der Fall ist, sollen die betreffenden Gene identifiziert werden.