Funktionelle Charakterisierung von B7-H3

Nach dem 2-Signal-Modell der Lymphozytenaktivierung erfolgt effiziente T- Zellstimulierung durch das Erkennen eines spezifischen Antigens und den Empfang eines zusätzlichen Signals, das durch die Interaktion kostimulatorischer Moleküle mit Rezeptoren auf T-Zellen übertragen wird. Die B7-Moleküle, B7.1, B7.2, sind die klassischen Kostimulatoren auf antigenpräsentierenden Zellen (APC). Sie aktivieren T-Zellen über CD28, können aber durch Interaktion mit CTLA-4 auch ein inhibitorische Signale auf T-Zellen übertragen. In den letzten Jahren wurden fünf weitere Mitglieder dieser Familie, sogenannte B7-Homologe, identifiziert. Für diese Moleküle wurden sowohl kostimulatorische als auch inhibitorische Funktionen in der T-Zellaktivierung beschrieben. B7-H3, ein solches B7-Homolog, ist aus mehreren Gründen interessant: Zur Funktion von B7-H3 während der T-Zellaktivierung liegen widersprüchliche Daten vor und obwohl es Hinweise für Liganden auf aktivierten T-Zellen gibt, konnten bis jetzt keine B7-H3-Rezeptoren identifiziert werden. Da B7-H3 nicht nur auf APC, sondern auch in peripheren Geweben, auf Tumorzelllinien und primären Tumoren exprimiert wird, könnte die Interaktion von B7-H3 mit solchen Rezeptoren eine wichtige Rolle in der Regulierung von Immunantworten spielen. Wir konnten in einer vorangegangenen Studie keinen Hinweis auf einen signifikanten Effekt von B7-H3 auf die Aktivierung primärer T-Zellen finden. Es ist jedoch durchaus möglich, dass die Bedeutung von B7-H3 - so wie auch die anderer B7-Homologe - hauptsächlich in seiner Wirkung auf aktivierte T-Zellen liegt. In diesem Projekt möchten wir daher unser Hauptaugenmerk auf die funktionellen Konsequenzen der Interaktion von B7-H3 mit aktivierten T-Zellen richten. Dazu werden wir mit unseren B7-H3 spezifischen Antikörpern den Effekt dieses Moleküls auf die Fähigkeit Dendritischer Zellen T-Zellen zu restimulieren untersuchen. Zusätzlich werden wir die Funktion von B7-H3 auf die T-Zellaktivierung in vereinfachten experimentellen Systemen testen. Mit Hilfe eines rekombinanten B7-H3-Ig-Fusionsproteins wollen wir einerseits die Interaktion von B7-H3 mit aktivierten T-Zellen untersuchen und andererseits mittels Expressionsklonierung Liganden für dieses Molekül isolieren.

Nach dem 2-Signal-Modell der Lymphozytenaktivierung erfolgt effiziente T- Zellstimulierung durch das Erkennen eines spezifischen Antigens und den Empfang eines zusätzlichen Signals, das durch die Interaktion kostimulatorischer Moleküle mit Rezeptoren auf T-Zellen übertragen wird. Die B7-Moleküle, B7.1, B7.2, sind die klassischen Kostimulatoren auf antigenpräsentierenden Zellen (APC). Sie aktivieren T-Zellen über CD28, können aber durch Interaktion mit CTLA-4 auch ein inhibitorische Signale auf T-Zellen übertragen. In den letzten Jahren wurden fünf weitere Mitglieder dieser Familie, sogenannte B7-Homologe, identifiziert. Für diese Moleküle wurden sowohl kostimulatorische als auch inhibitorische Funktionen in der T-Zellaktivierung beschrieben. B7-H3, ein solches B7-Homolog, ist aus mehreren Gründen interessant: Zur Funktion von B7-H3 während der T- Zellaktivierung liegen widersprüchliche Daten vor und obwohl es Hinweise für Liganden auf aktivierten T-Zellen gibt, konnten bis jetzt keine B7-H3-Rezeptoren identifiziert werden. Da B7-H3 nicht nur auf APC, sondern auch in peripheren Geweben, auf Tumorzelllinien und primären Tumoren exprimiert wird, könnte die Interaktion von B7- H3 mit solchen Rezeptoren eine wichtige Rolle in der Regulierung von Immunantworten spielen. Wir konnten in einer vorangegangenen Studie keinen Hinweis auf einen signifikanten Effekt von B7-H3 auf die Aktivierung primärer T-Zellen finden. Es ist jedoch durchaus möglich, dass die Bedeutung von B7-H3 - so wie auch die anderer B7-Homologe - hauptsächlich in seiner Wirkung auf aktivierte T-Zellen liegt. In diesem Projekt möchten wir daher unser Hauptaugenmerk auf die funktionellen Konsequenzen der Interaktion von B7-H3 mit aktivierten T-Zellen richten. Dazu werden wir mit unseren B7-H3 spezifischen Antikörpern den Effekt dieses Moleküls auf die Fähigkeit Dendritischer Zellen T-Zellen zu restimulieren untersuchen. Zusätzlich werden wir die Funktion von B7-H3 auf die T-Zellaktivierung in vereinfachten experimentellen Systemen testen. Mit Hilfe eines rekombinanten B7-H3-Ig-Fusionsproteins wollen wir einerseits die Interaktion von B7-H3 mit aktivierten T-Zellen untersuchen und andererseits mittels Expressionsklonierung Liganden für dieses Molekül isolieren.