Transfer von cblb-defizienten hyperreaktiven Immunzellen

Bis heute ist die therapeutische Effizienz der T-Zell-Therapien in der Klinik durch unzureichende in vivo Aktivierung, Expansion und Überleben der transferierten Effektor T-Zellen limitiert. Da diese suppressiven Signalen sowohl vom Tumor als auch von regulatorischen T-Zellen ausgesetzt sind, erscheinen Strategien, die transferierte Immunzellen resistent gegen das immunsuppressive Milieu machen, als sinnvoll, um gängige Immuntherapieregime zu verbessern. Genablation von casitas b-linage lymphoma proto-oncogene b (cblb), einem Mitglied der Familie der RING E3 Ubiquitinligasen und dominanter "tolerogener" T-Zellaktivierungs-Regulator, in CD8 + T-Zellen induziert potente Anti-Tumor-Antwort in immundefizienten Mäusen, da cblb-defiziente T-Zellen hyperproliferativ, unabhängig von CD28-Kostimulierung und resistent gegen Inhibierung durch TGF-beta sind. Unerwarteterweise jedoch reicht der alleinige Transfer von nicht-T-Zellrezeptor-transgenen cblb-defizienten T- Zellen nicht aus um auch in immunkompetenten Tieren eine Tumorabstoßung zu bewirken. Aus diesem Grund suchten wir nach einem experimentellen System, das die in vivo Selektion tumor-antigen-spezifischer T-Zellen und eine gesteigerte Proliferation ermöglicht. In einem ersten Ansatz kombinierten wir den Transfer cblb- defizienter CD8 + T-Zellen mit aktiver Immunisierung mit dentritischen Zellen und erreichten damit ein deutlich verlangsamtes Tumorwachstum und signifikant erhöhte Überlebensraten in präklinischen Tumormodellen. Da Cbl- b die Aktivierungsschwellenwerte verschiedenster an der Tumorimmunantwort beteiligter Zellen reguliert, sollen im Rahmen des beantragten HF-Projekts die zelltypspezifischen Funktionen von Cbl-b in Zellen des angeborenen und erworbenen Immunsystems systematisch untersucht werden. Aufgrund unseres bisherigen Wissens und unserer Vordaten sind dabei vorallem auf CD8 + und CD4 + T-Zellen, B-Zellen, natürliche Killerzellen und dendritische Zellen von Interesse. Anhand von cblb-/- knock out Immunzellen werden ex vivo die gesteigerten Immuneffektorfunktionen und in vivo die erhöhte Anti-Tumorantwort nach Immunzelltransfer untersucht. Dabei sollen die bereits etablierten induzierten als auch neue spontane endogene Maustumormodelle zum Einsatz kommen. Die zeitliche Kontrolle des Tumorwachstums soll über MRT (Magnetresonanztomographie)-Messungen erfolgen. Des weiteren sind detailierte Untersuchungen zum Migrationsvermögen der transferierten Zellen geplant, da bekannt ist, dass z.B. der Eintritt von T-Zellen in sekundäre lymphatische Organe Vorraussetzung für deren Aktivierung durch dendritische Zellen und die folgende Antitumorantwort ist. Zusätzlich sollen die Zelltransfers verschiedener cblb-defizienter Immunzellsubsets in Kombination mit chemotherapeutisch induziertem immunogenem Zelltod untersucht werden. Ausserdem werden potentielle Nebenwirkungen, wie mögliche Autoimmunreaktionen durch den Transfer der hyperreaktiven T-Zellen, detailiert untersucht.