Identifikation und Analyse von BRCA1 ubiquinilierungs Zielen

Im erblichen Brust- und Eierstockkrebs ist das Gen BRCA1 in 50-90% aller Faelle mutiert. Dies zeigt die wichtige Rolle, die das BRCA1 Gen in der Tumorvorbeugung spielt. Trotz intensiven Forschens ist die molekulare Grundlage von BRCA1 als Tumor suppressor noch nicht aufgeklaert worden. Viele genetische und biochemische Entdeckungen deuten darauf hin, dass die Tumor suppressor Funktion von BRCA1 durch seine Ubiquitin- Ligase Aktivitaet gesteuert wird. Daher ist die Aufklaerung der BRCA1 in vivo Ubiquitinilierungs Substraten eines der vorrangigen Ziele, um die Tumor suppressor Funktion von BRCA1 zu verstehen. Dies wird eine entscheidende Bedeutung fuer die Entwicklung neuerer und effektiverer Tumorpraeventions- Therapien und Tests sein. Ich moechte daher eine neue Methode anwenden um BRCA1 Ubiquitinilierungs Substrate in vivo identifizieren. Diese Methode wurde im gastgebenden Labor entwickelt um in vivo Substrate von Ubiquitin-Ligasen zu identifizieren. Die Methode kombiniert eine neu entwickelte Doppel- affinitaets- reinigungs- Methode fuer Ubiquitinilierte Proteine mit quantitativer Massenspectroscopie, Die Quantifizierung der Massenspectroscopie Ergebnisse beruht auf der verwendung von Aminosaeuren, die mit schweren Kohlenstoff Atomen ( 13C) markiert sind. Damit koennen quantitative Unterschiede im Ubiquinilierungs- Profil von BRCA1 + and BRCA1- Zellen festgestellt werden. Dieser Antrag konzentriert sich auf die Identifizierung von BRCA1 ubiquitinilierungs Substraten. Diese vorgeschlagene Strategie wird eine umfassende Auswirkung auf viele medizinische Disziplinen haben, weil sie auch auf zur Identifizierung von Substraten andere Ubiquitin-Ligasen angewendet werden kann.