Charakterisierung von Histomonas meleagridis Antigenen

Die Histomoniasis oder Schwarzkopfkrankheit wird verursacht durch den Parasiten Histomonas meleagridis. Der Erreger kommt sowohl bei Puten, mit einer sehr hohen Mortalität, als auch bei Hühnern, mit milderen Symptomen, aber mit hoher Morbidität, vor. Zahlreiche galliforme Vogelarten gelten als empfänglich. Seit April 2003 besteht ein EU-weites Verbot für den Einsatz jeglicher Prophylaktika und Therapeutika bei lebensmittelliefernden Tieren. In Folge dieses Verbotes wird vermehrt von Krankheitsausbrüchen berichtet, bis hin zum Verlust ganzer Bestände. Die aktuellen Entwicklungen haben das Fehlen von Grundlagenforschungsarbeiten zur Erforschung der Histomoniasis, insbesondere des Erregers Histomonas meleagridis, offenbart. Ziel der vorliegenden Arbeit ist es, H. meleagridis mittels molekularbiologischer Methoden näher zu untersuchen. Insbesondere sollen Proteine mit antigenischer Relevanz identifiziert und charakterisiert werden. Um einzelne antigenische Proteine von H. meleagridis zu identifizieren, wird eine cDNA Bibliothek von H.meleagridis in einem speziellen screening Verfahren benutzt. Dazu werden die Proteine aus der cDNA Bibliothek exprimiert und auf Reaktion mit Antisera von infizierten Hühnern untersucht. Zusätzlich werden auch Antisera von Kaninchen, die mit abgetöteten, hoch gereinigten Erregern infiziert waren, benutzt. Die positiven Klone werden anschließend sequenziert und mittels ausgedehnter Datenbanksuche charakterisiert. Für diese Untersuchungen werden sowohl die Nukleinsäure- als auch die Aminosäuresequenzen der entsprechenden Klone benutzt. Klone mit erheblichen Homologien zu schon beschriebenen Domänen oder Proteinen von anderen Protozoen, werden auf verschiedenen Ebenen weiteruntersucht. Ziel ist es, den jeweiligen Genlocus, Transkriptions-Start, die Transkriptmengen und -größen, wie auch die zelluläre Lokalisierung zu ermitteln.

Die Histomoniasis oder Schwarzkopfkrankheit wird verursacht durch den Parasiten Histomonas meleagridis. Der Erreger kommt sowohl bei Puten, mit einer sehr hohen Mortalität, als auch bei Hühnern, mit milderen Symptomen, aber mit hoher Morbidität, vor. Zahlreiche galliforme Vogelarten gelten als empfänglich. Seit April 2003 besteht ein EU-weites Verbot für den Einsatz jeglicher Prophylaktika und Therapeutika bei lebensmittelliefernden Tieren. In Folge dieses Verbotes wird vermehrt von Krankheitsausbrüchen berichtet, bis hin zum Verlust ganzer Bestände. Die aktuellen Entwicklungen haben das Fehlen von Grundlagenforschungsarbeiten zur Erforschung der Histomoniasis, insbesondere des Erregers Histomonas meleagridis, offenbart. Ziel der vorliegenden Arbeit ist es, H. meleagridis mittels molekularbiologischer Methoden näher zu untersuchen. Insbesondere sollen Proteine mit antigenischer Relevanz identifiziert und charakterisiert werden. Um einzelne antigenische Proteine von H. meleagridis zu identifizieren, wird eine cDNA Bibliothek von H. meleagridis in einem speziellen screening Verfahren benutzt. Dazu werden die Proteine aus der cDNA Bibliothek exprimiert und auf Reaktion mit Antisera von infizierten Hühnern untersucht. Zusätzlich werden auch Antisera von Kaninchen, die mit abgetöteten, hoch gereinigten Erregern infiziert waren, benutzt. Die positiven Klone werden anschließend sequenziert und mittels ausgedehnter Datenbanksuche charakterisiert. Für diese Untersuchungen werden sowohl die Nukleinsäure- als auch die Aminosäuresequenzen der entsprechenden Klone benutzt. Klone mit erheblichen Homologien zu schon beschriebenen Domänen oder Proteinen von anderen Protozoen, werden auf verschiedenen Ebenen weiteruntersucht. Ziel ist es, den jeweiligen Genlocus, Transkriptions-Start, die Transkriptmengen und - größen, wie auch die zelluläre Lokalisierung zu ermitteln.